CAS：273221-67-3，鈣熒光探針Fluo-4, AM 

CAS#：273221-67-3，Fluo-4, AM [ 鈣熒光探針Fluo-4, AM ]

CAS#：273221-67-3

中文名：鈣熒光探針Fluo-4, AM

英文名：1-[2-Amino-5-(2,7-difluoro-6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester                 

分子式：C51H50F2N2O23 

分子量：1096.94

結(jié)構(gòu)式：

性質(zhì)：

1. 外觀：橙紅色粉末

2. 純度：≥90%

3. 產(chǎn)品描述：

Fluo-4是一種將Fluo-3結(jié)構(gòu)中的Cl替換成F的鈣熒光探針。由于將Cl替換成了電子吸引力更強(qiáng)的F，它的大激發(fā)波長(zhǎng)會(huì)向短波長(zhǎng)處偏離10 nm左右。這個(gè)波長(zhǎng)更接近于氬激光器的波長(zhǎng)，所以用氬激光器激發(fā)時(shí)，Fluo-4的熒光強(qiáng)度比Fluo-3強(qiáng)一倍。

Fluo-4, AM穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-4，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)，Fluo-4若以游離配體形式存在時(shí)幾乎是非熒光性的，但是當(dāng)它與細(xì)胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，大激發(fā)波長(zhǎng)為494nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為516nm?？梢允褂眉す夤簿劢癸@微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。

4. 操作說明（for Human T cells）*
（1） 試劑
2 mM的Fluo-4, AM/DMSO（將1mg Fluo-4, AM溶于442µL DMSO） 
Pluronic F127
Hanks•balanced salt solution（HBSS） 
HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2，0.5mM MgCl2，5mM glucose，0.1% BSA，pH 7.4）
（2） 操作
①. 向Fluo-4, AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127可以    防止Fluo-4, AM在HBSS中聚合并能幫助其進(jìn)入細(xì)胞。
②. 用HBSS稀釋Fluo-4, AM溶液，制備4µM的Fluo-4, AM工作液。
③. 將Fluo-4, AM工作液加入細(xì)胞，在37℃培養(yǎng)20分鐘。
④. 加入5倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS，再繼續(xù)培養(yǎng)40分鐘。
⑤. 用HEPES buffer saline洗滌細(xì)胞3次，然后用HEPES buffer saline使細(xì)胞重懸浮，制成1×105 cells/mL的溶液。
⑥. 37℃下培養(yǎng)10分鐘，然后用該細(xì)胞進(jìn)行熒光鈣離子檢測(cè)。激發(fā)波長(zhǎng)494nm，發(fā)射波長(zhǎng)516nm。  
*標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，在每次實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)先確定條件。以上方法僅供參考。

儲(chǔ)存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

CAS：273221-67-3，鈣熒光探針Fluo-4, AM 

訂購說明：

1、大部分產(chǎn)品有現(xiàn)貨，正常情況下都能當(dāng)日發(fā)貨。

2、部分非常用產(chǎn)品，根據(jù)合成難易程度，貨期2-4周，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。

3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。

4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。

運(yùn)輸說明：

極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰，再用泡沫盒密封，放入的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速的送至您的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一。

低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝冰袋，再用泡沫盒密封，再放入的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速的送至您的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一。

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