蛋白交聯(lián)劑是一類小分子化合物，具有2個或者更多的針對特殊基團(-NH2、-COOH、-HS等)的反應性末端，可以和2個或者更多的分子分別偶聯(lián)，從而使這些分子結合在一起。70年代時人們普遍使用戊二醛作為蛋白質(zhì)交聯(lián)劑連接抗體和指示劑(如酶類)，但其缺點是由于交聯(lián)基團是隨機的，容易形成雜亂的多聚體。80年代，更具選擇特異性的交聯(lián)劑,例如NHS(針對-COOH)和馬來酰亞胺(針對-HS)在生命科學研究中得到了更為廣泛的應用。巧妙地運用交聯(lián)劑可以在蛋白質(zhì)相互作用研究，免疫學，癌癥治療等領域取得意想之外的收獲。截至2010年，市面常用的蛋白質(zhì)交聯(lián)劑大約有一百多種。

　　蛋白交聯(lián)劑的操作流程:首先將待交聯(lián)的蛋白質(zhì)A與交聯(lián)劑在一定條件下反應，得到的蛋白質(zhì)A-交聯(lián)劑中間體，然后移除多余的交聯(lián)劑，再加入欲交聯(lián)的蛋白質(zhì)B。產(chǎn)物中可能會形成多聚體，這一副產(chǎn)物通過調(diào)節(jié)反應條件來控制。分成兩部反應的目的在于減少分子內(nèi)交聯(lián)以及形成蛋白質(zhì)多聚物。另外，選擇異源交聯(lián)劑也可以減少多聚物的產(chǎn)生。

　　大多數(shù)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結合相互作用是瞬時的，通過交聯(lián)方法可以穩(wěn)定或連接相互作用復合物中的成分，從而有助于鑒別這些瞬時接觸。一旦相互作用的成分被共價偶聯(lián)，可以使用其他步驟(例如細胞裂解，親和純化和電泳)來制備分析樣品，同時可維持初的相互作用復合物。