蛋白交聯(lián)劑是一類小分子化合物，具有2個或者更多的針對特殊基團(tuán)(-NH2、-COOH、-HS等)的反應(yīng)性末端，可以和2個或者更多的分子分別偶聯(lián)，從而使這些分子結(jié)合在一起。70年代時人們普遍使用戊二醛作為蛋白質(zhì)交聯(lián)劑連接抗體和指示劑(如酶類)，但其缺點(diǎn)是由于交聯(lián)基團(tuán)是隨機(jī)的，容易形成雜亂的多聚體。80年代，更具選擇特異性的交聯(lián)劑,例如NHS(針對-COOH)和馬來酰亞胺(針對-HS)在生命科學(xué)研究中得到了更為廣泛的應(yīng)用。巧妙地運(yùn)用交聯(lián)劑可以在蛋白質(zhì)相互作用研究，免疫學(xué)，癌癥治療等領(lǐng)域取得意想之外的收獲。截至2010年，市面常用的蛋白質(zhì)交聯(lián)劑大約有一百多種。
蛋白交聯(lián)劑分為三大類：同源交聯(lián)劑，異源交聯(lián)劑，光反應(yīng)交聯(lián)劑。
同源交聯(lián)劑：具有兩個相同活化反應(yīng)基團(tuán)。應(yīng)用：一步反應(yīng)，分子內(nèi)交聯(lián)，多聚反應(yīng)，穩(wěn)定四級結(jié)構(gòu)
異源交聯(lián)劑：具有兩個不同活化反應(yīng)基團(tuán)。應(yīng)用：兩步反應(yīng)交聯(lián)，可減少聚集和自身交聯(lián)。
光反應(yīng)交聯(lián)劑：反應(yīng)原則：首先交聯(lián)不穩(wěn)定的熱反應(yīng)活性基團(tuán)（與第—種蛋白質(zhì)），然后UV交聯(lián)，將第—種蛋白質(zhì)交聯(lián)到第二種蛋白質(zhì)的N-H，C-H上。特點(diǎn)：交聯(lián)非特異性，產(chǎn)率低。
大多數(shù)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結(jié)合相互作用是瞬時的，通過交聯(lián)方法可以穩(wěn)定或連接相互作用復(fù)合物中的成分，從而有助于鑒別這些瞬時接觸。一旦相互作用的成分被共價偶聯(lián)，可以使用其他步驟(例如細(xì)胞裂解，親和純化和電泳)來制備分析樣品，同時可維持初的相互作用復(fù)合物。
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更新時間：2021-05-27
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