蛋白交聯(lián)劑是一類小分子化合物，具有2個(gè)或者更多的針對(duì)特殊基團(tuán)（-NH2、-COOH、-HS等）的反應(yīng)性末端，可以和2個(gè)或者更多的分子分別偶聯(lián)，從而使這些分子結(jié)合在一起。70年代時(shí)人們普遍使用戊二醛作為蛋白質(zhì)交聯(lián)劑連接抗體和指示劑（如酶類），但其缺點(diǎn)是由于交聯(lián)基團(tuán)是隨機(jī)的，容易形成雜亂的多聚體。80年代，更具選擇特異性的交聯(lián)劑,例如NHS（針對(duì)-COOH）和馬來(lái)酰亞胺（針對(duì)-HS)在生命科學(xué)研究中得到了更為廣泛的應(yīng)用。巧妙地運(yùn)用交聯(lián)劑可以在蛋白質(zhì)相互作用研究，免疫學(xué)，癌癥治療等領(lǐng)域取得意想之外的收獲。截至2010年，市面常用的蛋白質(zhì)交聯(lián)劑大約有一百多種。
蛋白交聯(lián)劑的操作流程:首先將待交聯(lián)的蛋白質(zhì)A與交聯(lián)劑在一定條件下反應(yīng)，得到的蛋白質(zhì)A-交聯(lián)劑中間體，然后移除多余的交聯(lián)劑，再加入欲交聯(lián)的蛋白質(zhì)B。產(chǎn)物中可能會(huì)形成多聚體，這一副產(chǎn)物通過(guò)調(diào)節(jié)反應(yīng)條件來(lái)控制。分成兩部反應(yīng)的目的在于減少分子內(nèi)交聯(lián)以及形成蛋白質(zhì)多聚物。另外，選擇異源交聯(lián)劑也可以減少多聚物的產(chǎn)生。
大多數(shù)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結(jié)合相互作用是瞬時(shí)的，通過(guò)交聯(lián)方法可以穩(wěn)定或永九連接相互作用復(fù)合物中的成分，從而有助于鑒別這些瞬時(shí)接觸。一旦相互作用的成分被共價(jià)偶聯(lián)，可以使用其他步驟（例如細(xì)胞裂解，親和純化和電泳）來(lái)制備分析樣品，同時(shí)可維持初的相互作用復(fù)合物。
熱門搜索：嵌段共聚物 PEG衍生物 上轉(zhuǎn)換納米顆粒 磷脂脂質(zhì)體 納米材料 熒光染料等
更新時(shí)間：2020-03-27
點(diǎn)擊次數(shù)：1526
當(dāng)前位置：
